因为黄杆菌感染的临床表现特异性不强，单纯从临床表现判断出是本菌感染是困难的，必须迅速取得标本，分离该菌。以血液琼脂或麦康凯琼脂平板，30℃培养18～24h挑取可疑菌落接种TSI，30℃24h培养，高层和斜面不产酸，氧化酶阳性，菌苔黄色，略带黏性，可疑黄杆菌，待进一步鉴定。下一步是定属，O-F试验为氧化型，产黄色素(少数不产生)，不扩散至培养基内;无动力，无芽孢;具有氧化酶和过氧化氢酶;革兰阴性杆菌或球杆菌。再下一步是定种，以生化试验确定菌种。重要的是上述脑膜脓毒黄杆菌与6群黄杆菌的鉴定，上已述及。

实验室检查：血白细胞数一般明显升高，可大于5.0×10⁹/L，中性粒细胞可达90%以上，有核左移现象。血沉常增快。合并有多器官功能衰竭及败血性感染者血中ALT升高，肾功异常。本病可并发血浆低渗透综合征，血钠、钾降低及血浆渗透压降低于尿渗透压。动脉血气分析可有低氧血症，高二氧化碳血症和酸中毒。　

其他辅助检查：心电图有些病人可出现低钾心电图异常改变及心律失常。